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基因編輯陽(yáng)性細(xì)胞篩選是指在基因編輯實(shí)驗(yàn)(如CRISPR/Cas9)后,通過特定方法識(shí)別和分離出成功發(fā)生目標(biāo)基因修飾的細(xì)胞。常用的篩選方法包括抗生素篩選(如利用抗性基因標(biāo)記)、熒光蛋白標(biāo)記篩選、PCR或測(cè)序驗(yàn)證等。這一過程對(duì)于獲得純合或雜合突變細(xì)胞系、研究基因功能或進(jìn)行疾病模型構(gòu)建至關(guān)重要。
CRISPR/Cas12a系統(tǒng)實(shí)驗(yàn):CRISPR/Cas12a(原稱 Cpf1)屬于 Class 2 Type V 型 CRISPR 系統(tǒng),是細(xì)菌與古菌的適應(yīng)性免疫機(jī)制,用于識(shí)別并切割入侵的病毒或質(zhì)粒 DNA。與 Cas9 相比,其du特的工作模式使其在基因編輯、分子檢測(cè)及多基因調(diào)控中展現(xiàn)顯著優(yōu)勢(shì)。
細(xì)胞基因編輯(又稱基因組編輯)是指利用分子工具在活細(xì)胞中定點(diǎn)插入、刪除或替換DNA堿基,從而改變基因功能或調(diào)控元件表達(dá)的技術(shù)。其核心機(jī)制依賴于DNA雙鏈斷裂(DSB)的誘導(dǎo)與修復(fù)
原代細(xì)胞分離純化實(shí)驗(yàn) 原代細(xì)胞分離純化是一項(xiàng)關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),它涉及從組織中提取未經(jīng)培養(yǎng)的細(xì)胞,并通過一系列步驟去除雜質(zhì),獲得高純度的細(xì)胞群體。
神經(jīng)元原代培養(yǎng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國(guó)內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些急待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對(duì)于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長(zhǎng)。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營(yíng)養(yǎng)條件均較為特殊。
小鼠神經(jīng)元原代培養(yǎng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國(guó)內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些急待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對(duì)于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長(zhǎng)。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營(yíng)養(yǎng)條件均較為特殊。
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